1、综合检测试卷综合检测试卷(B 卷卷) (时间：90 分钟 满分：100 分) 1.(12 分)(2018 浙江台州中学月考)回答下列(一)、(二)小题： (一)回答与果酒、果醋制作有关的问题： (1)在酿酒过程中，酵母菌只有在无氧条件下才能进行_。 (2)下列各项中，与果酒中的酒精浓度有关的是_(多选)。 A.发酵时间 B.发酵温度 C.培养液中糖的含量 D.酵母菌对酒精浓度的耐受程度 (3)不同地域所酿制的葡萄酒风味会有一定的差异，出现风味差异的原因除了与当地相应的土 壤、气候等地理环境因素和葡萄品种有关外，还可能与不同地域酿酒时所用的_等生 物因素有关。 (4)在利用果酒制作果醋过程中，如
2、果已获得醋化醋杆菌菌种，可先在液体培养基中进行 _培养，然后接种到发酵瓶中。发酵瓶下口直角玻璃管内塞有松紧合适的脱脂棉球， 其作用是_。开始收集果醋前，应检测发酵瓶流出液的_。 (二)通过农杆菌介导转入法培养转基因植物的过程如下图(图中表示相应操作过程)。 请 回答下列问题： (1)如果外源基因的核苷酸序列是未知的，可以建立一个包括外源基因来源生物中所有基因的 _来获取外源基因。图中过程涉及的工具酶是_。 (2)将外源遗传物质与受体植物细胞(包括原生质体受体)遗传物质重新组合，除了转基因技术 外， 还有_等方法， 这些方法解决了传统育种方法存在的_ 的缺陷。 植物原生质体的获取可以在较高渗透压
3、环境下， 用_酶处理根尖、 叶片、愈伤组织或悬浮培养细胞的细胞壁。 (3)如果构建重组细胞的目的是为了获取重要的次生代谢产物(如某些中药)，可以通过大量培 养特定_来达到目的。 (4)如果农杆菌侵染对象为某植物叶片，将被侵染的叶片除菌后进行培养，最终得到转基因植 物。下列叙述中正确的是_。 A.愈伤组织在合适条件下经脱分化形成再生植株 B.再生的芽在细胞分裂素含量较高的培养基上生根 C.叶片在含合适浓度生长素的培养基上经再分化形成愈伤组织 D.愈伤组织在细胞分裂素和生长素配比较高的培养基上形成芽 答案 (一)(1)酒精发酵 (2)ABCD (3)菌种 (4)扩大 过滤空气 pH (二)(1)基
4、因文库 DNA 连接酶 (2)细胞融合或显微注射 远缘亲本难以杂交(或生殖隔离) 纤维素酶和果胶 (3)细胞系 (4)D 解析 (一)(1)酒精发酵是指酵母菌的厌氧呼吸。 (2)在酵母菌的厌氧呼吸中，在细胞中酶的催化下，葡萄糖经过一系列化学反应，分解成酒精 和 CO2，并合成少量能量。在该过程中，酒精产量的多少，受到发酵时间、发酵温度、培养 液中糖的含量和酵母菌对酒精浓度的耐受程度的影响。(3)不同地域所酿制的葡萄酒风味会有 一定的差异，出现风味差异的原因除了与当地相应的土壤、气候等地理环境因素和葡萄品种 有关外，还可能与不同地域酿酒时所用的菌种等生物因素有关，因为不同菌种产生的酶存在 差异。
5、(4)液体培养基可用于菌种的扩大培养。发酵瓶下口直角玻璃管内塞有松紧合适的脱脂 棉球，其作用是过滤空气，防止杂菌污染。醋化醋杆菌会将果酒转化成果醋，导致发酵液 pH 值下降，因此开始收集果醋前，应检测发酵瓶流出液的 pH 值。 (二)(1)如果外源基因的核苷酸序列是未知的，可以建立一个包括外源基因来源生物中所有基 因的基因文库来获取外源基因。图中过程是构建重组 DNA 分子，涉及到的工具酶是 DNA 连接酶。 (2)将外源遗传物质与受体植物细胞(包括原生质体受体)遗传物质重新组合，除了转基因技术 外，还有细胞融合或显微注射等方法。这些方法解决了传统育种方法存在的远缘亲本难以杂 交(或生殖隔离)
6、的缺陷。植物的细胞壁主要成分是纤维素和果胶，因此可以在较高渗透压环 境下，用纤维素酶和果胶酶处理根尖、叶片、愈伤组织或悬浮培养细胞的细胞壁。 (3)获取重要的次生代谢产物(如某些中药)可通过破碎细胞来获得，可以通过大量培养特定细 胞系来达到目的。 (4)将被农杆菌侵染的叶片除菌后进行植物组织培养，可得到转基因植物。该过程需经过脱分 化生成愈伤组织，然后再分化生成胚状体或丛芽，进而获得转基因植物。培养基中细胞分裂 素和生长素配比较低时形成根，配比较高时形成芽，比例适中时形成愈伤组织。愈伤组织在 合适条件下经再分化形成再生植株， A 项错误； 再生的芽在生长素含量较高的培养基上生根， B 项错误；
7、叶片在含合适浓度生长素的培养基上经脱分化形成愈伤组织，C 项错误；愈伤组 织在细胞分裂素和生长素配比较高的培养基上形成芽，D 项正确。 2.(10 分)回答下列(一)、(二)小题： (一)如图是“分离以尿素为氮源的微生物”实验的基本流程，请回答下列问题： (1)该实验培养基应该含有_。 A.尿素 B.氯化钠 C.葡萄糖 D.琼脂糖 (2)尿素溶液可用_使之无菌，若要检查 B 过程灭菌是否彻底，可以采用的 方法是_。 (3)图中步骤 C 为_，相对于划线分离法，过程 D 涂布分离法的优点是_。 (4)如果菌落周围出现_色环带，说明该菌落能分泌脲酶。 (二)下面是一幅农业生态系统模式图，请据图分析
8、回答下列问题： (1)农业生态系统的主要成分是_，建立生态农业的指导思想是_。 (2)该人工农业生态系统与天然生态系统相比， 其稳定性较_， 主要原因是_ _。 (3)将农作物秸秆做饲料；牲畜粪便倒入沼气池；发酵产生的沼气做燃料；沼气池中的沼渣做 肥料。这样做的目的是_。 答案 (一)(1)ABCD (2)G6 玻璃砂漏斗过滤 将空白培养基放在适宜温度下培养一段时间， 观察有无菌落出现 (3)倒平板 单菌落更易分开 (4)红 (二)(1)农作物 环境与经济协调发展 (2)低 生物种类少，营养结构简单，自我调节功能小 (3)实现能量的多级利用，提高能量利用效率 解析 (一)(1)分解尿素的细菌是
9、异养微生物，因此培养基中应该加入有机碳源，如葡萄糖； 分离分解尿素的微生物的培养基从功能上分属于选择培养基，应该以尿素为唯一氮源；从物 理性质上分属于固体培养基，因此应加入凝固剂琼脂糖。故选 ABCD。 (2)尿素溶液可用 G6 玻璃砂漏斗过滤使之无菌。若要检查 B 过程灭菌是否彻底，可以采用的 方法是将空白培养基放在适宜温度下培养一段时间，观察有无菌落出现。 (3)图中步骤 C 为倒平板。相对于划线分离法，过程 D 涂布分离法的优点是单菌落更易分开。 (4)如果菌落周围出现红色环带，说明该菌落能分泌脲酶。 (二)农田生态系统的主要成分仍然是生产者农作物，建立生态农业的指导思想是实现环 境和经
10、济协调发展，使经济效益和环境效益实现双赢。和自然生态系统相比，该人工农业生 态系统的生物种类少，营养结构简单，自我调节功能小，稳定性较低。 3.(12 分)(2018 金华高二检测)回答下列(一)、(二)小题： (一)耐高温淀粉酶在大规模工业生产中有很大的实用性。如图表示从热泉的嗜热菌样品中进 行筛选分离菌种，经过耐高温淀粉酶的提纯和固定化后，用于工业化生产的过程。请回答： (1)过程进行的操作为_，过程实施的是_分离法；可根据号培养基上 _的大小，来确定需扩大培养的目标菌种。 (2)号培养基中除了加入淀粉外，还需加入另一种重要的营养成分是_(A.琼脂 B.葡萄糖 C.硝酸铵 D.碳酸氢钠)，
11、并放在高温条件下培养。 (3)将适量经提纯的耐高温淀粉酶通过_法固定在石英砂上，形成固定化酶柱，此后用 一定浓度的淀粉溶液进行过柱试验，可往流出液中滴加_溶液检测酶的催化效果，但 结果发现流出液显蓝色，请分析在上述操作中存在的问题可能是_ _( 至 少 写 出两点)。 (二)通过转基因技术培育出乳汁中含人 酪蛋白的山羊，其流程如下图。回答有关问题： (1)基因工程的核心是图中的_(用图中数字回答)过程；如果要利用人类基因组构建含 酪蛋白基因的基因文库，该过程_(填“需要”或“不需要”)限制性核酸内切酶参 与。若要检测乳汁中是否出现人 酪蛋白，可用的检测物质是_(填“人 酪蛋白基因”或“人 酪蛋
12、白抗体”)。 (2)过程一般是通过_法实现的。当形成转基因受精卵后，需要经过一段时间的 体外培养， 这一过程中不需要的措施是_(A.培养液中加入动物血清 B.培养液要及时 更换成分 C.加入饲养层细胞 D.放在 CO2培养箱中)。 (3)过程的实现必须通过_技术；通过过程实现转基因山羊的克隆繁殖，要通 过_技术形成重组细胞后，再经胚胎工程实现。 答案 (一)(1)稀释 涂布 菌落周围透明圈 (2)C (3)吸附 KII2 固定化操作后未用蒸 馏水洗涤；要取反应一段时间后的流出液进行显色反应；液体过柱的流速过快等 (二)(1) 需要 人 酪蛋白抗体 (2)显微注射 C (3)胚胎移植 核移植 解
13、析 (一)(1)据图分析可知，过程为梯度稀释，过程的接种方法为涂布分离法；部分嗜 热菌在号培养基上生长时可产生淀粉酶， 分解培养基中的淀粉后会在菌落周围形成透明圈， 透明圈越大， 说明产生的淀粉酶越多， 应挑选透明圈大的菌落接种在号培养基上继续培养。 (2)在培养微生物的培养基中， 碳源和氮源必不可少， 所以除淀粉外还应加入硝酸铵作为氮源。 (3)固定化酶催化淀粉水解后流出的液体应该不含淀粉， 可往流出液中滴加 KII2溶液检测酶 的催化效果；若发现流出液显蓝色，在上述操作中存在的可能原因是固定化操作后未用蒸馏 水洗涤；要取反应一段时间后的流出液进行显色反应；液体过柱的流速过快等。 (二)(1
14、)基因工程的核心步骤是基因表达载体的构建(形成重组 DNA 分子)，即图中过程；如 果要利用人类基因组构建含 酪蛋白基因的基因文库，该过程需要限制性核酸内切酶参与； 若要检测乳汁中是否出现人 酪蛋白，可用抗原抗体杂交法，因此可用的检测物质是人 酪蛋白抗体。(2)过程表示将目的基因导入受体细胞，一般用显微注射法；受精卵培养过程 中，培养液中应加入动物血清并及时更换成分，A、B 正确；不需要加入饲养层细胞，C 错 误；动物细胞培养需要放入 CO2培养箱中，D 正确。(3)过程表示胚胎移植过程；过程要 实现转基因山羊的克隆繁殖，需通过核移植技术形成重组细胞后，再经胚胎工程实现。 4.(12 分)(2
15、018 浙江名校协作体 3 月选考模拟)回答下列(一)、(二)小题： (一)某研究小组欲利用苹果生产苹果酒和苹果醋。回答下列问题： (1)欲纯化野生酵母，最简单的分离方法是_，经过培养后，培养基上出现 _，表示分离成功。 (2)在酿制苹果酒时，加入果胶酶将果胶分解成可溶性的_，瓦解植 物的胞间层，提高果汁的出汁率和澄清度。 (3)为提高生产效率，做了以下对比实验。甲发酵罐中保留一定量的氧气，乙发酵罐中没有氧 气，其余条件相同且适宜，定期测得的数据如图所示。 甲发酵罐提供氧气的目的是_。 实验后检测发现，尽管酵母菌菌种合适、原料充足、发酵温度和 pH 适宜，但乙醇含量比预 期低，可能在操作上的失
16、误是_。 (4)利用苹果酒酿制苹果醋的过程中，下列相关说法错误的是_。 A.苹果酒一般需稀释后用于果醋发酵 B.醋化醋杆菌需用液体培养基扩大培养后接种 C.菌种和锯末混匀后立即打开双通活塞，进行发酵 D.监控果醋发酵情况时需每天用 pH 试纸检测流出液的 pH (二)科学家将蜘蛛的蛛丝蛋白基因导入山羊体内，得到转基因山羊，使羊奶中含有一种独特 的蛛丝蛋白，生产原理见下图。请回答下列问题： (1)将蛛丝蛋白基因和载体通过甲过程形成的 X 物质为_， 可用_ 法将 X 导入受体细胞。 (2)为了获得蛛丝蛋白，图中的受体细胞应该选择_(填性别)羊的体细胞，要使重组细 胞具有全能性，乙过程需要的技术操
17、作是_。 (3)下列关于丙过程的叙述，正确的是_。 A.该过程所用培养液的成分与乙过程相同 B.该过程需定期用胰蛋白酶处理成细胞悬液进行传代培养 C.该过程为动物细胞培养，目的是获得更多的重组细胞 D.该过程中供体核 DNA 上原有的调节蛋白会被卵细胞质中的蛋白因子替换 (4)为了快速繁殖转基因山羊，可在丁过程前对早期胚胎进行_，经培养后再分别 移植到同期发情处理的_的代孕母羊的相应部位。 答案 (一)(1)划线分离法 单菌落 (2)半乳糖醛酸和半乳糖醛酸甲酯 (3)使酵母菌进行需 氧呼吸，快速繁殖 密封不严 (4)C (二)(1)重组 DNA 分子 显微注射 (2)雌 核移植 (3)D (4
18、)胚胎分割 未经配种 解析 (一)(1)欲纯化野生酵母，常用划线分离法或者涂布分离法进行接种，其中划线分离法 最简单；经过培养后，观察培养基上微生物的单菌落，从中选出酵母菌。 (2)果胶酶可将果胶分解成可溶性的半乳糖醛酸和半乳糖醛酸甲酯，瓦解植物的胞间层，提高 果汁的出汁率和澄清度。 (3)甲发酵罐提供氧气的目的是让酵母菌进行需氧呼吸，快速繁殖，以增加酵母菌的数量；实 验后检测发现，尽管酵母菌菌种合适、原料充足、发酵温度和 pH 值适宜，但乙醇含量比预 期低，在操作上的失误可能是密封不严，导致酵母菌厌氧呼吸受到抑制。 (4)苹果酒一般需稀释后用于果醋发酵， A 正确； 醋化醋杆菌需用液体培养基
19、扩大培养后接种， B 正确；醋化醋杆菌是好氧菌，和锯末混匀后，过一段时间打开双通活塞，进行发酵，C 错 误；监控果醋发酵情况时需每天用 pH 试纸检测流出液的 pH，D 正确。 (二)(1)据图分析可知，图中 X 表示重组 DNA 分子，将其导入动物细胞常用显微注射法。 (2)根据题意分析，该实验的目的是从羊奶中提取独特的蛛丝蛋白，因此图中的受体细胞应该 选择雌羊的体细胞；由于体细胞核的全能性受到了限制，因此应该将体细胞核通过核移植技 术移植到去核的卵母细胞中去，获得的重组细胞才能具有表达细胞核的全能性的能力。 (3)乙、丙分别表示核移植技术和早期胚胎培养技术，两者需要的培养液的成分不完全相同
20、， A 错误；该过程需要培养成早期胚胎，不能用胰蛋白酶分散成单个细胞，B 错误；该过程为 动物细胞培养，目的是获得早期胚胎，C 错误；该过程中供体核 DNA 上原有的调节蛋白会 被卵细胞质中的蛋白因子替换，D 正确。 5.(8 分)回答下列(一)、(二)小题： (一)各种微生物对氧的需求是不同的，研究组开展了氧对微生物的影响实验，请回答下列问 题： (1)将含有 LB 固体培养基(刚配好，尚未凝固)的锥形瓶放入高压蒸汽灭菌锅，若在 121 条 件下灭菌，则灭菌时间一般为_min，灭菌时间从_开始。灭完菌后 将锥形瓶取出，待温度下降到 60 (不烫手的温度)时，用_擦拭桌面和双手，在超 净工作台
21、的_旁将锥形瓶中的 LB 培养基分装到一系列试管中，并做标记。 (2)当试管温度下降到 40 (培养基还是液态)时，用灭菌过的移液器吸取 0.1 mL 的各类微生 物悬液加到相应试管中并封口，双手快速搓动试管，使菌种_于培养基内后迅速 将封口的试管放置在_条件下使培养基凝固。 (3)将上述试管放置于常温条件下培养 48 小时后观察实验结果，下图中表示果酒制作菌种的 图是_。 (二)下图为培育抗病转基因植物操作过程，请回答下列问题： (1)抗病基因与载体结合常用_处理，获得 的重组载体通过_法导入_形原生质体中。 (2)图中表示_，培养过程中需保持_，防止杂菌污染，愈伤组织需适当配 比的_和生长
22、调节剂诱导。 (3)抗病转基因植物获得的原理是_。 答案 (一)(1)15 达到规定压力 酒精棉 酒精灯火焰 (2)均匀分布 低温 (3)B (二)(1)相同的限制性核酸内切酶和 DNA 连接酶 显微注射 球 (2)脱分化 无菌 营养物 质 (3)基因重组和植物细胞全能性 6.(10 分)回答下列(一)、(二)小题： (一)有些细菌可分解原油，从而消除由原油泄漏造成的土壤污染。某同学欲从污染的土壤中 筛选出高效降解原油的菌株。回答下列问题： (1)无菌操作是微生物实验中重要的一项技术，下列常用的无菌操作中错误的是_。 A.用酒精擦拭双手 B.用氯气消毒水源 C.实验操作应在酒精灯火焰附近进行
23、D.玻璃器皿(吸管、培养皿)可用酒精擦拭 (2)在筛选过程中，应将土壤样品稀释液接种于以_为唯一碳源的固体培养基上，从功 能上讲，该培养基属于_培养基。 (3)纯化菌种时，为了得到单菌落，常采用的接种方法有两种，即_和 _。 (4)为了筛选出高效菌株，可比较单菌落周围透明圈的大小，透明圈大说明该菌株的降解能力 _。 (二)为了更好地分解石油，通过基因工程产生超级细菌。下图 a 表示基因工程中经常选用的 载体pBR322 质粒，Ampr表示氨苄青霉素抗性基因，Tetr表示四环素抗性基因。目的基因 如果插入某抗性基因中，将使该基因失活，而不再具有相应的抗性。为了检査载体是否导入 原本没有 Ampr
24、和 Tetr的大肠杆菌(受体细胞)，将大肠杆菌涂布在含氨苄青霉素的培养基上培 养，得到如图 b 的结果(黑点表示菌落)。再将灭菌绒布按到培养基上，使绒布面沾上菌落， 然后将绒布按到含四环素的培养基上培养， 得到如图 c 的结果(空圈表示与 b 对照无菌落的位 置)。据此分析并回答下列问题： (1) 将 重 组 的 DNA 分 子 导 入 受 体 细 胞 时 ， 用 _ 处 理 大 肠 杆 菌 ， 增 大 _。 (2)pBR322 质粒的化学本质是_，其控制着_等性状。与 图 c 空圈相对应的图 b 中的菌落表现型是_，由此说明目的基因 插入了_中。 (3)基因工程成功的标志是_。 答案 (一)
25、(1)D (2)原油 选择 (3)划线分离法 涂布分离法 (4)强 (二)(1)氯化钙 细胞壁的通透性 (2)DNA 抗氨苄青霉素和抗四环素 能抗氨苄青霉素，但 不能抗四环素 Tetr (3)目的基因在受体细胞中成功表达 7.(12 分)(2018 龙湾高一期末)回答下列(一)、(二)小题： (一)泡菜是人们喜爱的食品，但在腌制的过程中会产生一定量的亚硝酸盐，危害人们的健康。 研究人员检测了不同浓度的食盐、不同发酵阶段的泡菜中的亚硝酸盐含量，结果如图所示。 请回答下列问题： (1)制作泡菜时如希望发酵快一些，可将蔬菜放在_中浸泡 1 分钟后入坛。发酵坛中还 可加一些白酒，加白酒的目的是增加醇香
26、感和_。 (2)据图分析，下列叙述错误的是_。 A.腌制泡菜的最佳食盐用量约为 5% B.过多的食盐可能会抑制发酵作用 C.腌制初期泡菜的亚硝酸盐含量上升 D.食用泡菜最安全的是腌制后 39 天 (3)在利用光电比色法测定泡菜亚硝酸盐含量时，在样品溶液中加入显色剂会生成_ 色产物。绘制标准曲线时，可以亚硝酸钠的质量为横坐标，以_为纵坐标。对 样品和标准溶液的测定中，要用光程相同的_。 (二)我国目前临床使用的乙肝疫苗大多为基因工程疫苗，其有效成分是一种叫做乙肝表面抗 原的蛋白质(S 蛋白)，对应的基因为 s 基因。请回答下列问题： (1)在构建重组 DNA 分子时， 要用限制性核酸内切酶处理_
27、， 并用_ 酶使两者结合。将重组 DNA 分子导入到哺乳动物细胞，经筛选得到工程细胞。 (2)在细胞培养过程中，工程细胞在生长过程中有_现象，需要定期使用 _酶处理，以便于分瓶培养。 (3)为提高工程细胞培养的成功率，下列措施中不需采用的是_。 A.取单个细胞进行培养 B.加入胰岛素 C.CO2培养箱 D.加入动物血清 (4)由于哺乳动物细胞培养较难，成本较高，近些年科学家们又发明了“乳腺生物发生器”， 进而从转基因动物的乳汁中提取所需产品。在这种技术中，作为重组 DNA 分子受体细胞的 一般是_。 答案 (一)(1)开水 抑制杂菌生长 (2)D (3)紫红 光密度值 比色杯 (二)(1)s
28、基因和载体 DNA DNA 连接 (2)接触抑制 胰蛋白 (3)A (4)受精卵 解析 (一)(1)制作泡菜时如希望发酵快一些，可将蔬菜放在开水中浸泡 1 分钟后入坛。发酵 坛中还可加一些白酒，加白酒的目的是增加醇香感和抑制杂菌生长。 (2)腌制泡菜的最佳食盐用量约为 5%，A 正确；过多的食盐可能会抑制发酵作用，B 正确； 腌制初期泡菜的亚硝酸盐含量上升，C 正确；食用泡菜最安全的是腌制后 913 天，D 错误。 (3)在利用光电比色法测定泡菜亚硝酸盐含量时，在样品溶液中加入显色剂会生成紫红色产 物。绘制标准曲线时，可以亚硝酸钠的质量为横坐标，以光密度值为纵坐标。对样品和标准 溶液的测定中，
29、要用光程相同的比色杯。 (二)(1)在构建重组 DNA 分子时，要用限制性核酸内切酶处理 s 基因和载体 DNA，并用 DNA 连接酶使两者结合。 (2)在动物细胞培养过程中存在接触抑制现象， 需要定期使用胰蛋白酶处理， 以便于分瓶培养。 (3)取单个细胞进行培养不会提高工程细胞培养的成功率，A 错误；胰岛素能促进血糖进入组 织细胞，因此提高工程细胞培养的成功率，应该在培养基中添加胰岛素，B 正确；动物细胞 培养时需要一定的气体环境，因此需要放在 CO2培养箱中培养，C 正确；动物细胞培养时， 为了给细胞提供充足的营养，需要在培养基中加入动物血清，D 正确。 (4)培育转基因动物时，受精卵的全
30、能性最高，应该以受精卵作为受体细胞。 8.(12 分)回答下列(一)、(二)小题： (一)某同学用新鲜的泡菜汁为实验材料分离纯化出乳酸菌，用来生产酸奶。分离纯化所用固 体培养基中因含有碳酸钙而不透明，乳酸菌产生的乳酸能溶解培养基中的碳酸钙。回答下列 问题： (1)分离纯化乳酸菌时，首先需要用_对泡菜汁进行梯度稀释，然后采用 _法进行分离，可获得乳酸菌的单菌落。 (2) 推 测 分 离 纯 化 所 用 的 培 养 基 中 加 入 碳 酸 钙 的 作 用 有 _ 和 _。分离纯化时应挑选出_的菌落作为候选菌。 (3)获得纯化的乳酸菌后， 可以利用纯牛奶作为原料制作酸奶， 发酵常在_(A.有氧常 温
31、 B.无氧常温 C.有氧低温 D.无氧低温)条件下进行。如果使用的是加了某些抗生 素的纯牛奶作原料制作酸奶，很有可能会发酵成怪味“酸奶”，其原因可能是 _。 (二)科学家用转基因方法培育“巨型小鼠”。 图 1 为含大鼠生长激素基因的 DNA 及限制性核 酸内切酶切割位点示意图；图 2 为含有相应标记基因和限制性核酸内切酶切割位点的质粒示 意图，其中 npt为卡那霉素抗性基因，Tc 为四环素抗性基因，lacZ 为蓝色显色基因，复制 原点是质粒上必需的一段复制起始的序列，与重组质粒的自主复制有关；图 3 是转基因过程 中的一个步骤。回答下列问题： (1)根据图 1，在获得目的基因时，应使用限制性核
32、酸内切酶_(填“Pvu”或 “EcoR”)进行切割。可以选择图 2 中的质粒_(填“A”或“B”)作为目的基因的 载体，理由是_。 (2)图 3 表示基因工程中将重组 DNA 分子导入受体细胞的过程，该步骤采用的技术方法是 _，通常选择_ 作为受体细胞。 (3)获得含目的基因的细胞后，该细胞需要进行_，然后再进行移植； 通常移植最适宜的时期是发育到_(A.2 细胞胚胎 B.4 细胞胚胎 C.早期囊胚 D.原 肠胚)，再经分娩产仔就可以获得“巨型小鼠”。 答案 (一)(1)无菌水 涂布分离 (2)鉴别分离乳酸菌 中和产生的乳酸(或酸) 具有透明 圈 (3)B 抗生素具有杀菌作用，会杀死乳酸菌，导
33、致乳酸发酵不能顺利进行 (二)(1)Pvu A 选择质粒 A，其复制原点不会被限制性核酸内切酶切割，复制原点序列保 持完整 (2)显微注射法 受精卵 (3)胚胎体外培养 C 解析 (一)(1)乳酸菌属于厌氧菌，可用涂布分离法分离纯化乳酸菌。具体操作为首先用无菌 水对泡菜汁进行梯度稀释，然后采用涂布分离法进行分离，获得乳酸菌的单菌落。 (2)分离纯化所用的培养基中加入碳酸钙的作用是中和乳酸菌代谢过程中产生的乳酸和利于 乳酸菌的鉴别和分离；分离纯化所用固体培养基中因含有碳酸钙而不透明，乳酸菌产生的乳 酸能溶解培养基中的碳酸钙，因此，分离纯化时应挑选出具有透明圈的菌落作为候选菌。 (3)乳酸菌属于厌
34、氧菌，其厌氧呼吸可产生乳酸，而且低温会抑制与厌氧呼吸有关酶的催化活 性，所以获得纯化的乳酸菌后，制作酸奶的发酵常在“无氧常温”条件下进行，故 B 项正 确；抗生素具有杀菌作用，会杀死乳酸菌，导致乳酸发酵不能顺利进行，因此，如果使用的 是加了某些抗生素的纯牛奶作原料制作酸奶，很有可能会发酵成怪味“酸奶”。 (二)(1)分析题图 1 可以发现，限制性核酸内切酶 EcoR的切割位点处于目的基因中，而限制 性核酸内切酶 Pvu 的切割位点正好位于目的基因两端，所以在获得目的基因时，应使用限 制性核酸内切酶 Pvu进行切割；分析图 2 可知，质粒 A 中的复制原点不会被限制性核酸内 切酶切割，复制原点序
35、列保持完整，而在用切割目的基因的限制性核酸内切酶 Pvu切割质 粒 B 时，其复制原点会被限制性核酸内切酶切割，从而影响重组质粒的自主复制，因此，可 以选择图 2 中的质粒 A 作为目的基因的载体。 (2)图 3 表示基因工程中将重组 DNA 分子导入受体细胞的过程，该步骤采用的技术方法是显 微注射法，通常选择动物的受精卵作为受体细胞。 (3)获得含目的基因的细胞后，该细胞需要进行胚胎体外培养，然后再进行移植；通常移植最 适宜的时期是发育到早期囊胚，再经分娩产仔就可以获得“巨型小鼠”。 9.(12 分)(2018 浙江 11 月选考，32)回答下列(一)、(二)小题： (一)回答与微生物培养及
36、应用有关的问题： (1)对培养基进行高压蒸汽灭菌时，灭菌时间应从_时开始计时。对于不耐 热的液体培养基，一般可将其转入 G6 玻璃砂漏斗中，采用_方式可较快地进行过滤 灭菌。 (2)与酿造果醋相比，利用大米、高粱等富含淀粉的原料制醋，需增加_的 过程。某醋化醋杆菌培养基由蛋白胨、酵母提取物和甘露醇组成，其中甘露醇的主要作用是 _。 (3)为筛选胞外 淀粉酶分泌型菌种， 一般从_(A.果园树下 B.肉类加工厂周围 C. 米酒厂周围 D.枯树周围)获得土样，用无菌水稀释，涂布到含有淀粉的选择培养基上培养， 一段时间后在培养基表面滴加碘液，可在菌落周围观察到透明的水解圈。若要筛选酶活性较 高的菌种，
37、需挑选若干个_比值大的菌落，分别利用液体培养基振荡 培养进行扩增。然后将培养液离心，取_用于检测酶活性。 (二)某农业生态工程示意图如下，回答下列问题： (1)该农业生态工程体现的生态工程原理主要是_。对该工程的经济效益分析，可 从系统内部的投入和产出、_、系统的有效贡献等三方面进行核算。 (2)若要提高该工程的经济效益，可采用农业生产的_技术在桑基上再种植大豆，也可 采用农业生态工程的_技术放养适量的鸡鸭等动物以调整该工程的产 业结构。 (3)某小组应用基因工程方法开展适用于该生态工程的抗虫植物改良研究。 为提高将重组DNA 分子导入受体细胞的效率，除考虑导入方法、筛选条件、防止污染外，还需
38、考虑的主要因素 有_ (答出 2 点即可)。农杆菌介导法是目前植物转基因的常用方法，该方法的基本过程是农杆菌 感染植物时，_， 并将其插入到受体细胞的基因组中。欲获得稳定遗传的抗虫性强的转基因植物品种，则转入 的抗虫基因必须能在受体细胞中_。 答案 (一)(1)达到设定的温度或压力值 抽滤 (2)将淀粉分解成糖 作为碳源 (3)C 水解圈直径与菌落直径 上清液 (二)(1)物质循环 系统的实际消费 (2)间种 种植业和畜牧业合理优化 (3)重组 DNA 的质量和浓度、受体细胞的生长状态与密度 携带目的基因的 Ti 质粒转移到受 体细胞 稳定和高效地表达 解析 (一)(1)高压蒸汽灭菌的计时时间
39、从达到设定的温度或压力值开始， 采用抽滤方式用 G6 玻璃砂漏斗进行过滤灭菌。(2)将淀粉分解成糖，便于微生物的利用，醋化醋杆菌培养基中的 甘露醇的主要作用是作为碳源。(3)筛选富含 淀粉酶的菌种要在富含淀粉的环境中筛选，故 选 C。水解圈直径与菌落直径比值越大说明菌种分泌的酶活性越高。 (二)(1)农业生态工程的主要原理是物质循环(再生)， 农业生态工程的效益分析包括三方面： 对 系统的投入和产出、系统的实际消费、系统的有效贡献等。 (2)桑基上种植大豆属于间种，桑基上放养适当的鸡鸭等动物用到的技术是种植业和畜牧业合 理优化技术。 (3)影响重组 DNA 导入受体细胞的效率的因素主要有重组 DNA 的质量和浓度、 受体细胞的生 长状态与密度等。农杆菌介导法的基本过程：农杆菌感染植物携带目的基因的 Ti 质粒转移 到受体细胞将其插入到受体细胞的基因组中。只有抗虫基因在受体细胞内稳定和高效地表 达，才能获得稳定遗传的抗虫性强的转基因植物。
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