1、动物细胞培养和核移植技术基础巩固1在动物细胞培养过程中，使用胰蛋白酶的目的是( )A使动物组织分散为单个细胞B去掉细胞壁，使其成为原生质体C去掉细胞膜，暴露出原生质体便于细胞融合D促进蛋白质水解为多肽2一般来说，动物细胞体外培养需要满足以下哪些条件( )无毒的环境 无菌的环境 合成培养基需加血浆 温度与动物的体温相近 需要 O2，也需要 CO2 适宜的 pHA BC D3从母羊甲的体细胞中取出细胞核，注入到母羊乙的去核卵母细胞中，融合后的细胞经卵裂形成早期胚胎，再植入到另一只母羊丙的子宫内，出生小羊的大多数性状( )A像甲 B像乙 C像丙 D难以预测4中科院动物研究所与福州大熊猫研究中心合作，
2、通过将大熊猫细胞核植入去核后的兔子卵母细胞中，在世界上最早克隆出一批大熊猫早期胚胎，表明我国大熊猫人工繁殖研究再次走在世界前列。下列描述与克隆无关的是( )A “复制” B无性繁殖C组织培养 D基因工程5用于核移植的供体细胞一般都选用( )A受精卵B传代培养 10 代以内的细胞C传代培养 1050 代以内的细胞D处于减数第二次分裂中期的次级卵母细胞能力提升6下列关于哺乳动物体细胞核移植技术的叙述，不正确的是( )A该技术的难度明显高于胚胎细胞核移植B通常采用 M中期的卵母细胞作为受体细胞C可通过显微操作法除去卵母细胞核D克隆动物是对提供体细胞的动物进行了完全复制7下列属于动物细胞培养与植物组织
3、培养区别的是( )A动物细胞培养所用的培养基的成分与植物的不同B动物细胞培养不需要在无菌条件下进行C动物细胞培养过程中可发生基因重组，而植物组织培养不能D植物组织培养和动物细胞培养都体现了细胞的全能性8动物细胞体外培养时，通常要在培养基中补充一定浓度的某些物质。如图是血清对正常细胞和癌细胞培养影响的实验结果，从该图提供的信息不能获得的结论是( )A正常细胞与癌细胞的增殖速率相同B有无血清对正常细胞培养的影响不同C培养基中补充血清有助于正常细胞的培养D培养基中是否补充血清对癌细胞的培养影响不大9下列关于动物细胞培养的叙述中，正确的是( )A细胞的癌变发生于原代培养向传代培养的过渡过程中B动物细胞
4、培养液中通常含有葡萄糖、氨基酸、无机盐、生长素和动物血清等C动物细胞培养的目的是获得大量的细胞分泌蛋白D动物细胞培养前和培养过程中都要用胰蛋白酶处理10不能作为组织培养、细胞培养或克隆的生物材料是( )A花粉 B幼叶C卵细胞 D人血中的成熟红细胞11如图为动物细胞培养过程示意图，请据图回答下列问题：(1)进行培养的细胞往往取自于胚胎或幼龄动物，原因是_。(2)容器 A 中的动物器官或组织首先要剪碎，然后用胰蛋白酶处理，其目的是_。(3)培养先在 B 瓶中进行。瓶中的培养基成分有糖、氨基酸、促生长因子、无机盐、微量元素和_等。细胞增殖产生的新细胞会表现出_生长现象。当细胞分裂生长到_时，就会停止
5、分裂增殖，这种现象称为接触抑制，需用胰蛋白酶处理后分瓶继续培养，称为_。有一类不正常的动物细胞，体外培养不受接触抑制机制的制约而表现为“疯长” ，这类细胞最可能是_。(4)细胞在 C 瓶中培养一段时间后，大部分细胞衰老死亡，但有极少数细胞存活并传代下去，这些细胞的遗传物质_，它能够无限传代的原因是_。12下图是我国克隆牛的培育过程，据图回答下列问题：(1)细胞 A 是_ ，细胞 B 是_。(2)一个重组细胞 D 发育成丁牛出生，涉及的细胞增殖方式是_。(3)丁牛的性别和_牛的性别相同，原因是_。(4)能否直接用细胞 A 体外培养形成胚胎，并移植到丙牛子宫并发育成健康的小牛出生？为什么？_。(5
6、)上述方法培育出克隆动物，与植物组织培养技术培育出完整植株相比，获得的后代在遗传物质方面有什么不同？_。个性拓展13现有 A 和 B 两个肉牛品种，A 品种牛的细胞组成可表示为 A 细胞核、A 细胞质，B 品种牛则为 B 细胞核、B 细胞质。(1)如果要获得一头克隆牛，使其细胞由 A 细胞核和 B 细胞质组成，基本步骤是：从 A 品种牛体内取出体细胞，进行体外培养，然后再从培养细胞中取出_注入 B 品种牛的_卵母细胞，经过某种刺激和培养后，可形成胚胎，该胚胎被称为_，将该胚胎移入代孕母牛的_中，通过培育可达到目的。(2)上述过程中运用了动物细胞工程的哪些技术？_。(3)克隆牛的产生说明_具有全
7、能性。由 A、B 两品种杂交得到的牛与克隆牛相比，杂交牛细胞核的遗传物质来自_个亲本，细胞质来自_性亲本，克隆牛和杂交牛的遗传物质组成_( 填“相同”或“不同”) 。(4)请举一例，说明克隆牛培育成功的实际意义。_。答案精析1A 在进行动物细胞培养前，先用胰蛋白酶使组织块中的细胞相互分散开来，以增加与培养液的接触面积，便于培养。2A 动物细胞培养一般需要无菌、无毒的环境；一定的营养；一般保持与动物相近的体温和适宜的 pH 以及气体环境等。3A 生物的性状遗传可以分为由细胞核内 DNA 控制的细胞核遗传(主要)和由细胞质基因控制的细胞质遗传。经该过程出生的小羊的大多数性状像甲(细胞核遗传)，少数
8、性状像乙(细胞质遗传)，一般不会出现像丙的性状。4D 克隆是一种无性繁殖方式。子代与亲本相同，因而也可以认为是由亲本“复制” 而来的；该过程需采用组织培养技术，但与基因工程无关。5B6D 克隆动物细胞核中的遗传物质来自提供细胞核的动物，其细胞质中的遗传物质来自提供卵母细胞的动物，因而克隆动物的性状主要与提供细胞核的亲本相同，而不是对提供体细胞的动物的完全复制，故选项 D 错。动物体细胞分化程度高，恢复其全能性十分困难，因而哺乳动物体细胞核移植技术的难度明显高于胚胎细胞核移植；由于 M中期的卵母细胞含有能促进细胞分裂的物质，因此通常采用 M中期的卵母细胞作为核移植的受体细胞；通过显微操作法用微型
9、吸管将卵母细胞核和第一极体一并吸出。7A 动物细胞培养所用的培养基的成分与植物的培养基不同，如培养动物细胞的培养基需加入血清、血浆等，而植物细胞组织培养基则不需加入，故选项 A 正确；动植物细胞培养都需要在无菌、人工控制的条件下进行；动植物细胞培养过程中细胞的分裂都是有丝分裂，都不发生基因重组；植物组织培养最终能够形成完整的植物体，能体现植物细胞的全能性，动物细胞培养不能最终培养成完整的动物体，不能体现动物细胞的全能性。8A 从图中可以看出，随着培养时间的延长，癌细胞的数量比正常细胞显著增多，因此正常细胞与癌细胞的增殖速率不同。从图中还可以看出，有无血清对正常细胞培养影响很大，而对癌细胞影响不
10、大，因此在培养基中补充血清对正常细胞的培养有利，而对癌细胞的培养，有无血清其结果都一样，都是快速增殖。9D 动物细胞培养的过程是这样的：取动物组织块(动物胚胎或幼龄动物的器官或组织)剪碎用胰蛋白酶处理分散成单个细胞制成细胞悬液转入培养瓶中进行原代培养 贴满瓶壁的细胞重新用胰蛋白酶处理分散成单个细胞继续传代培养。由此看出 D 项正确。10D 人血中的成熟红细胞，没有细胞核，不能作为组织培养、细胞培养或克隆的生物材料。11(1)胚胎或幼龄动物的器官、组织中的细胞代谢旺盛，分裂能力强 (2) 使器官或组织分散成单个细胞，每个细胞可以与培养液充分接触 (3)动物血清、血浆 贴壁 表面相互接触 传代培养
11、 癌细胞 (4)发生改变 细胞遗传物质发生改变，带有癌细胞的特点，能无限增殖解析 (1)胚胎或幼龄动物的同一器官或组织的细胞较成年和老年的分裂能力强，代谢旺盛，更适合进行细胞培养。(2)用胰蛋白酶处理动物的器官或组织碎块，能使其分散成单个细胞，形成细胞悬液，有利于细胞的生长和增殖。(3)进行动物细胞培养，需要在培养基中加入一定量的动物血清、血浆，内含多种营养物质和促进细胞生长和繁殖的物质；体外进行细胞培养，细胞会表现出贴壁生长现象，当它们分裂生长到表面相互接触时，细胞的分裂增殖就会停止，即所谓的接触抑制，而癌细胞不受这一机制制约，表现为“疯长” 。出现接触抑制时，需对细胞进行传代培养。(4)传
12、代培养到大约 50 代，大部分细胞不能继续传代，但一部分细胞核内遗传物质发生类似于癌变的改变，能无限增殖，成为细胞系。12(1)高度分化的体细胞 卵母细胞 (2)有丝分裂(3)甲 牛的性别由细胞核内的性染色体决定，丁牛的性染色体与甲牛相同 (4) 目前不能。高度分化的动物体细胞由于基因的选择性表达而失去了进一步分裂分化的能力，但卵母细胞中却含有必要的分裂分化调节因子 (5)在遗传物质上(不考虑发育过程中的变异)，植物组织培养形成的植株与提供体细胞的植物植株完全相同，而克隆动物由于卵母细胞细胞质基因的贡献而与提供体细胞核的动物不完全相同解析 从“重组细胞”到动物个体出生的过程中，细胞增殖不会有减
13、数分裂方式，这一情况同自然状态下受精卵发育成动物个体类似；牛的性别决定方式是 XY 型，由细胞核内性染色体控制其性别；动物克隆从目前来看，只能是“核移植” ，并没有真正做到产生的动物与原来被克隆的动物在遗传物质上 100%的相同。单纯用高度分化的体细胞在体外诱导形成胚胎，继而植入子宫内完成发育，从理论上讲是完全可能的，但目前在实践上还有很大难度。13(1)细胞核 去核 重组胚胎 子宫(2)动物细胞核移植和动物细胞培养(3)动物体细胞核 两 雌 不同(4)保护濒危物种，繁育优良品种，医学上克隆器官等解析 动物的克隆所用的方法是核移植，也就是把动物体细胞的细胞核移入去核的卵母细胞中，然后经过某些刺激和培养后可形成重组胚胎，再移入代孕动物的子宫中继续发育，从而获得克隆个体。克隆动物的成功说明了动物体细胞核具有全能性，克隆动物的遗传物质与提供细胞核的个体基本一致。在体细胞克隆动物中不仅用到了核移植，还用到了动物细胞培养。
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