1.4 微生物的利用 学案(含答案)
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1、第第 4 课时课时 微生物的利用微生物的利用 学习导航 1.阅读教材 P1921内容,学习从土壤中分离纤维素分解菌的基本实验操作技术。 2.结合教材 P2122内容,探究纤维素分解菌是否只能分解纤维素。3.结合教材 P2224内容,了 解制作豆豉的原理、方法步骤。 重难点击 1.掌握从土壤中分离纤维素分解菌的基本实验操作技术。 2.探究纤维素分解菌是 否只能分解纤维素。3.简述制作豆豉的原理。 一一、从土壤中分离纤维素分解菌从土壤中分离纤维素分解菌 土壤中含有很多有益菌,下面以分离纤维素分解菌为例,探讨从土壤中分离有益菌的方法。 1分离的原理 (1)土壤中存在大量纤维素分解菌,包括真菌、细菌和
2、放线菌等,它们可以产生纤维素酶,分 解和利用纤维素和半纤维素。 (2)在用纤维素作为唯一碳源的选择培养基中,纤维素分解菌能很好地生长,并产生黄色或棕 绿色色素,其他微生物则不能生长。 2方法步骤 (1)纸条法 制备培养基 配制依姆歇涅茨基液体培养基,避免纤维素,以外碳源的污染。 分装 按每试管5 mL分装,然后加入7 cm1 cm的无淀粉新华一号滤纸条 滤纸条紧贴内壁,且有一半长度浸入液体培养基中,121 灭菌20 min。 制备土壤稀释液 制备10 1、102、103、104和105的土壤稀释液。 接种培养 分别吸取各稀释度的土壤稀释液1 mL接种到滤纸条上,每个稀释度 重复4次,置培养箱中
3、28 培养14 d。 观察 检查各试管中滤纸条上出现的菌落和滤纸颜色变化情况, 根据菌落和颜色的变化确定纤维素分解菌的类型。 (2)固体培养法 制备培养基 制备依姆歇涅茨基培养基平板,避免纤维 素以外的碳源污染;然后在平板上铺一张 直径略小于平板的滤纸,用少量的依姆 歇涅茨基液体培养基润湿。 接种培养 在滤纸上等距放8个直径约10 mm的土粒, 盖上培养皿盖以保持湿度,置恒温培养箱中 28 30 培养。 观察 每隔2 d观察土粒周围滤纸变色情况,直到 滤纸颜色变化,长成菌落,于4 冰箱中保 存备用。 1分析依姆歇涅茨基培养基,回答下列问题: (1)此配方是液体培养基还是固体培养基?为什么选择此
4、类培养基? 答案 液体培养基,因为配方中无凝固剂。液体培养基与微生物的接触更密切,微生物更容 易从培养基中获得营养物质,因此可以快速增加微生物的浓度。 (2)这个选择培养基对微生物是否具有选择作用?怎样设计对照实验证明你的观点? 答案 有选择作用。本配方中富含纤维素,更适合能够分解纤维素的微生物大量繁殖。对照 实验可以用牛肉膏蛋白胨培养基培养微生物。若选择培养基上微生物数量明显少于牛肉膏蛋 白胨培养基上微生物的数量,则说明培养基起到了选择作用。 (3)依姆歇涅茨基培养基配方中缺少哪种营养成分? 答案 没有碳源。 2要从菜园或果园土壤中分离纯化纤维素分解菌的关键是什么? 答案 关键在于培养基中的
5、唯一碳源为纤维素,根据能分解纤维素产生黄色或棕绿色色素的 典型特征,来判断分离得到的微生物是否为纤维素分解菌。 3鉴定分离到的纤维素分解菌还可以用刚果红染色法,其原理是什么? 答案 刚果红可以与纤维素形成红色复合物,当纤维素被纤维素酶分解后,红色复合物无法 形成,出现以纤维素分解菌为中心的透明圈,我们可以通过是否产生透明圈来筛选纤维素分 解菌。 归纳总结 土样 纤维素为唯一碳源的培养基 纤维素分解菌 黄色或棕绿色色素 1下列有关分解纤维素微生物的分离的叙述,不正确的是( ) A纤维素酶的发酵方法有液体发酵和固体发酵 B对分解纤维素的微生物进行了初步筛选后,无需再进行其他实验 C纤维素酶的测定方
6、法,一般是对所产生的葡萄糖进行定量的测定 D纤维素酶是一种复合酶 答案 B 解析 初步筛选只是分离纯化的第一步。为确定得到的是纤维素分解菌,还需要进行发酵产 生纤维素酶的实验。 一题多变 (1)上题中分解纤维素的细菌能否在不含纤维素但富含其他有机物的环境中生存?为什么? 答案 能。纤维素分解菌分解纤维素只是为了利用纤维素作为碳源,其他有机物若可提供碳 源,也可以生存。 (2)题中纤维素酶也在微生物细胞内分解纤维素吗?为什么? 答案 不在细胞内分解纤维素。多数细胞不能直接吸收纤维素,一般来说,纤维素酶都是分 泌到细胞外分解纤维素的。 2分析下表培养基的配方,请回答下面的问题: 纤维素分解菌的选择
7、培养基: 组分 含量 纤维素粉 5 g NaNO3 1 g Na2HPO4 7H2O 1.2 g KH2PO4 0.9 g MgSO4 7H2O 0.5 g KCl 0.5 g 酵母膏 0.5 g 水解酪素 0.5 g 将上述物质溶解后,用蒸馏水定容到 1 000 mL。 (1) 此 培 养 基 配 方 中 为 微 生 物 提 供 碳 源 的 主 要 是 _ 、 氮 源 是 _。 (2)此配方为_培养基(根据物理状态)配方。 (3)此培养基选择出的微生物主要是_ _。 问题导析 (1)该培养基中纤维素是主要的碳源,所以可以用于筛选纤维素分解菌。 (2)由于该培养基中没有加入琼脂,所以为液体培养
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