1.1 培养基的配制和灭菌 学案(含答案)
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1、第第 1 课时课时 培养基的配制和灭菌培养基的配制和灭菌 学习导航 1.阅读教材 P4、P7内容,掌握培养基的作用、营养成分、种类及制备。2.阅读教 材 P5、P10内容,区分消毒和灭菌,掌握不同物品的灭菌方法。 重难点击 1.掌握制备培养基的原理。2.区分消毒和灭菌。 一、培养基一、培养基 在实验室条件下进行科学研究或在工业生产上大规模制造微生物产品都需要用到培养基。 1概念:是人工配制的适合微生物生长繁殖或积累代谢产物的营养基质,用以培养、分离、 鉴定和保存各种微生物。 2成分 (1)培养基一般都含有水、碳源、氮源、微量元素和无机盐等,有时候还需要加入特殊的营养 物质。 (2)判断下面培养
2、基的各种成分能提供的营养物质类别 成分 FeSO4 蔗糖 (NH4)2SO4 提供的营养 无机盐 碳源 氮源 3.分类:不同种类微生物的生长繁殖对营养的要求不同,通过选择不同的培养基,人为控制 培养基的 pH、碳源、氮源、渗透压等条件,使选择的培养基利于某类或某种微生物的生长, 而不利于其他微生物的生存,可以达到分离、培养不同微生物的目的。 (1)根据物理状态分为液体培养基和固体培养基,主要区别是后者加入了凝固剂琼脂。 (2)用途 液体培养基:用于各种生理、代谢研究和获得大量菌体;用于发酵工业生产。 固体培养基:应用于微生物的分离、纯化、培养、保存和鉴定等。另外,一些由天然固体 基质制成的培养
3、基也属于固体培养基。 1培养基的成分与作用 (1)试根据微生物的同化作用类型将微生物进行分类。 答案 分为自养型微生物和异养型微生物。 (2)试从碳源和氮源的角度分析不同类型的微生物所需的培养基成分的特点。 项目 自养型微生物 异养型微生物 碳源 CO2、NaHCO3等无机物 糖类等有机物 氮源 NH3、硝酸盐等无机物 尿素、蛋白质等有机物 2.牛肉膏蛋白胨培养基 (1)牛肉膏蛋白胨培养基中提供碳源和氮源的物质各是什么? 答案 牛肉膏和蛋白胨都可以为微生物提供碳源和氮源。 (2)牛肉膏蛋白胨培养基中主要提供碳源和主要提供氮源的物质各是什么? 答案 主要提供碳源的是牛肉膏,主要提供氮源的是蛋白胨
4、。 1下列关于培养基的说法正确的是( ) A培养基是为微生物的生长繁殖提供营养的基质 B培养基只有两类:液体培养基和固体培养基 C除水以外的无机物只能提供无机盐 D无机氮源不可能提供能量 答案 A 解析 根据培养基的物理性质,可分为液体培养基、半固体培养基和固体培养基,在液体培 养基中加入不同量的凝固剂如琼脂可形成半固体或固体培养基;除水以外的无机物如 NH4HCO3,既可以是碳源,也可以是氮源,不仅仅提供无机盐;无机氮源有时也能提供能量, 如 NH3可以为硝化细菌提供能量。 方法链接 培养基的种类 分类标准 培养基种类 培养基特点 作用 物理性质 固体培养基 外观固态 微生物的分离、计数等
5、半固体培养基 容器放倒不致流出, 剧烈 振动则破散 观察微生物的运动、 鉴定 菌种等 液体培养基 呈液态 常用于工业生产 功能 选择培养基 允许特定种类的微生物 生长, 同时抑制或阻止其 他微生物生长 选择、分离 鉴别培养基 根据微生物的代谢特点, 在培养基中加入某种指 鉴定 示剂或化学药品 成分 来源 天然培养基 化学成分还不清楚 工业上大规模的微生物 发酵生产 合成培养基 化学成分完全了解 在实验室用来对微生物 分析 2下列培养基配方中能作为选择培养基、鉴别培养基的依次是( ) 原料 蛋白胨/g 10 10 10 10 乳糖/g 5 5 5 5 蔗糖/g 5 5 5 5 KH2PO4/g
6、2 2 2 2 伊红/g 0.4 美蓝/g 0.065 琼脂/g 10 20 NaCl/g 20 蒸馏水 /mL 1 000 1 000 1 000 1 000 A. B C D 答案 D 解析 高浓度的食盐可以抑制多种细菌的生长,但不影响金黄色葡萄球菌的生长,从而可以 将金黄色葡萄球菌分离出来,有高浓度食盐的培养基为选择培养基。在培养基中加入伊红和 美蓝,可以用来鉴别是否存在大肠杆菌,有伊红和美蓝的培养基为鉴别培养基。 一题多变 (1)表格中的蛋白胨主要为微生物提供何种营养成分? 答案 主要为微生物提供碳源、氮源和维生素。 (2)乳糖和蔗糖在培养基中的作用是什么? 答案 可以为微生物提供碳源
7、和能源。 (3)如果用培养基培养某种自养微生物,则该配方中的哪种物质可以去除? 答案 乳糖和蔗糖。 特别提醒 有关培养基营养物质的四点提醒 (1)培养不同的微生物所需要的营养物质可能不同 自养型微生物的培养基主要以无机营养为主。 异养型微生物的培养基主要以有机营养为主。 (2)对异养微生物来说,含 C、H、O、N 的化合物既是碳源,又是氮源、能源。 (3)微生物需要补充生长因子,是由于缺乏合成这些物质所需要的酶或合成能力有限。 (4)微生物需要量最大的是碳源。能合成含碳有机物的是自养型,反之则为异养型。 二二、灭菌灭菌 由于配制培养基的各类营养物质和容器等含有多种不同的微生物。配制好的培养基必
8、须立即 灭菌, 及时杀灭培养基中的微生物, 同时防止微生物大量繁殖造成的培养基营养成分的改变。 常用的培养基灭菌方法是高压蒸汽灭菌,其原理是高压蒸汽属于湿热蒸汽,穿透力大,蒸汽 由气态变为液态时能放出大量的热, 可以迅速提高被灭菌物品的温度, 从而增加灭菌的效果; 灭菌时还需要一定的压力,保证灭菌温度达到要求。 1“无菌操作”与人们的生活休戚相关,无时无处不在。在日常生活、生产实践、自身健康 防护中,有哪些“无菌操作”的例子? 答案 日常生活、生产实践、自身健康防护中“无菌操作”的例子分别有:(1)被褥、鞋袜要 常晒;肉制品储存时用盐腌等。(2)家畜阉割后,要在其伤口处涂抹一些酒精或白酒;初冬
9、杨 树树干涂刷生石灰水等。(3)打针时,注射部位要用酒精棉球擦洗,一般要在其伤口处涂抹一 些碘酒。 2 消毒和灭菌的原理是什么?消毒和灭菌都能杀死所有的微生物吗?是否适用于所有的生物 和物品? 答案 (1)都是使微生物的蛋白质变性,借此杀死微生物。(2)灭菌可杀死处理材料中的全部微 生物(包括芽孢和孢子),而消毒仅能杀死物体表面或内部的部分微生物(一般不包括芽孢和孢 子)。(3)不是, 无菌技术既要考虑效果, 又要考虑操作对象的承受能力。例如, 活体生物材料、 操作者的双手等只能消毒,而不能灭菌。 3无菌技术除了用来防止实验室的培养物被其他外来微生物污染外,还有什么目的? 答案 还能有效避免污
10、染环境以及操作者自身被微生物感染。 4 无论是接种微生物还是制备培养基中的倒平板, 都要在酒精灯火焰附近进行, 请简述理由。 答案 在酒精灯火焰附近进行接种或倒平板,目的是造成一个无菌环境,避免操作过程中受 到杂菌的污染。 归纳总结 消毒和灭菌的比较 (1)消毒是指使用较为温和的物理或化学方法仅杀死物体表面或内部的部分对人体有害的微 生物(不包括芽孢和孢子)。常用的方法有紫外线消毒法、巴氏消毒法、化学药物消毒法。 (2)灭菌是指使用强烈的理化因素杀死物体内外所有的微生物,包括芽孢和孢子。常用的方法 有火焰灭菌、干热灭菌、间歇灭菌法、蒸汽持续灭菌法、高压蒸汽灭菌法。 3高温灭菌的原理是( ) A
11、每种微生物生长的最适温度是一定的 B微生物对于高温环境不适应 C高温破坏了微生物细胞内的蛋白质、核酸,影响其生命活动 D高温降低了环境中氧的浓度 答案 C 解析 高温的致死作用主要是使微生物的蛋白质和核酸等重要生物大分子物质发生不可逆转 的变性。 4培养基、培养皿、接种环、实验操作者的双手、空气、牛奶所采用的灭菌或消毒方法依次 是( ) 化学消毒 火焰灭菌 干热灭菌 紫外线消毒 高压蒸汽灭菌 巴氏消毒法 A B C D 答案 A 解析 培养基用高压蒸汽灭菌;培养皿能耐高温,常用干热灭菌;接种环可用火焰灭菌达到 迅速彻底的灭菌效果;实验操作者的双手可用化学药剂进行消毒,如用酒精擦拭双手;对空 气
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