2023届高三生物一轮复习高中生物实验考点细列(修订版)
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1、一、高倍显微镜的使用(详参上课笔记) 二、还原糖、脂肪、蛋白质的鉴定 p18 (一)把握原理、试剂、颜色变化 1. 共同点:颜色(显色)反应故选材原则:色浅易得含量高色浅易得含量高 2. 还原糖鉴定:还原糖+斐斐林试剂林试剂砖红色沉淀(需水浴水浴加热)。颜色变化:淡蓝色到砖红色淡蓝色到砖红色。 3. 蛋白质鉴定:蛋白质+双缩双缩脲脲试剂试剂紫色络合物。淡蓝色到紫色淡蓝色到紫色。 4. 脂肪鉴定:(1)组织样液法(2)切片法 脂肪+苏丹苏丹 III橘橘黄色黄色;脂肪+苏丹苏丹 IV红色红色。 5. 淀粉鉴定:遇碘变蓝(高中阶段变蓝,若新信息题给了新信息则按信息处理) (二)各物质鉴定注意点: 1
2、. 还原糖鉴定 (1)本质:鉴定还原糖:所有单糖+麦芽糖+乳糖。(高中阶段非还原糖:所有多糖+蔗糖) (2)斐林试剂:甲液:0.1g/mLNaOH 乙液:0.05g/mLCuSO4 (3)使用方法:等量混合、现用现配、水浴加热等量混合、现用现配、水浴加热 2. 蛋白质鉴定 (1)本质:碱性条件下鉴定肽键。肽键数2。鉴定多肽链、蛋白质。 (所以,正常蛋白质或蛋白质变性、盐析、初步水解后也可发生显色反应正常蛋白质或蛋白质变性、盐析、初步水解后也可发生显色反应) (2)双缩脲试剂:A 液:0.1g/mLNaOH B 液:0.01g/mLCuSO4 (可知,A 液液=甲液;甲液;B 液可由
3、乙液用蒸馏水稀释液可由乙液用蒸馏水稀释 5 倍而制倍而制) (3)使用方法:先先 A 后后 B,A 过量 B 少许。先先 A 目的是提供碱性环境目的是提供碱性环境。 3. 脂肪鉴定组织样液法(无需显微镜) (1)步骤:往脂肪组织样液中直接加入苏丹 III(苏丹 IV),混匀后即出现橘黄色(红色)。 4. 脂肪鉴定切片法(需光学显微镜和 50%酒精) (1)步骤: 切取花生种子薄片苏丹 III 或苏丹 IV 染色吸去染液滴加 50%酒精洗去浮色酒精洗去浮色 (浮色就是染液)滴一滴清水后盖上盖玻片镜检(先低后高)结果:显微镜下看到橘黄色或红色脂肪颗粒。 5. 总结: (1)用到酒精:脂肪鉴定-50
4、%;色素提取-无水乙醇无水乙醇或 95%乙醇+无水碳酸钠;配解离液-95%;冲洗卡诺氏液;调查土壤小动物-诱虫器-70%酒精。 (2)用到盐酸:DNA 和 RNA 在细胞中的分布-8%;配解离液-15% 三、观察 DNA 和 RNA 在细胞中的分布 p26 1. 背景知识:真核生物细胞中,DNA 主要分布在细胞核内,RNA 主要分布在细胞质中。 2. 原理: 甲基绿和吡罗红对 DNA 和 RNA 的亲和力不同亲和力不同,用甲基绿和吡罗红的混合混合染色剂对细胞染色,甲基绿甲基绿使DNA 呈绿色呈绿色,吡罗红吡罗红使 RNA 呈现红色呈现红色。 盐酸作用:一、改变细胞膜的通透性,加速染色剂进入细胞
5、改变细胞膜的通透性,加速染色剂进入细胞;二、使染色质中的使染色质中的 DNA 和蛋白质分离,利和蛋白质分离,利于于 DNA 与染色剂中的甲基绿结合。与染色剂中的甲基绿结合。 3. 选材:颜色反应,所以材料要色浅,常用人的口腔上皮细胞、洋葱鳞片叶内内表皮细胞 4. 步骤:“取水冲冷茶”“取取水冲冲染察察”。以观察人的口腔上皮细胞为例: 取材制片:滴加 0.9%的 NaCl 溶液至洁净载玻片上用消毒牙签刮取漱净口腔内侧壁并涂抹在液滴中点燃酒精灯烘干载玻片。 (0.9%的的 NaCl:维持细胞形态:维持细胞形态 烘干:让细胞固定在载玻片上)烘干:让细胞固定在载玻片上) 水解:载玻片放入质量分数 8%
6、盐酸中,30(利于水解)保温 5min。 冲洗涂片:蒸馏水的缓水流冲洗载玻片 10s。(目的:冲去残留盐酸) 染色:混合染色剂染色 5min吸去多余染液盖上盖玻片 观察:先低后高。低倍镜下:选择染色均匀、色泽浅的区域,移至视野中央使物像清晰。高倍镜下,观察结果:真核细胞真核细胞 DNA 主要主要分布在细胞核中,分布在细胞核中,RNA 主要主要分布在细胞质中。分布在细胞质中。 5. 注意注意:(1)本实验目的是通过颜色区别观察核酸的分布分布,不是鉴定核酸种类。 鉴定 DNA:DNA+二苯胺蓝色(沸水浴),选修 1 考。鉴定 RNA,不考。 实在要鉴定,可用一种酶(RNA 酶或 DNA 酶)和两种
7、底物(DNA、RNA)。 (2)原核细胞的 DNA 位于细胞核的拟核或质粒中。 四、制备(纯净)细胞膜 p41 1. 选材:人和其他哺乳动物成熟红细胞人和其他哺乳动物成熟红细胞 原因原因:没有细胞壁,没有细胞核和众多细胞器 常见干扰项常见干扰项:鸡的成熟红细胞(X)、蛙的成熟红细胞(X) 2. 方法:吸水涨破法吸水涨破法+离心技术(若在试管中进行) 五、鉴定死细胞和活细胞 p43 1. 方法:染色排除法 2. 原理:活细胞细胞膜具有选择透过性选择透过性 3. 试剂:台盼蓝台盼蓝+细胞细胞活细胞不变色,死细胞呈蓝色活细胞不变色,死细胞呈蓝色 六、用高倍显微镜观察叶绿体和线粒体 p47
8、 【观察线粒体】 1. 背景知识:线粒体普遍存在于动植物细胞中,形态多样如短棒状、圆球状、哑铃形等。 2. 试剂:新制的质量分数 1%的健那绿染液健那绿染液(0.5g 健那绿充分溶解(30-40)于 50mL 生理盐水) 3. 原理: 健那绿染液是专一性染线粒体专一性染线粒体的活细胞染料活细胞染料, 可使活细胞中线粒体呈线粒体呈蓝绿色蓝绿色, 而细胞质接近无色细胞质接近无色。 4. 操作:高倍镜下,观察染色后的人口腔上皮细胞。 5. 结果:看到蓝绿色的线粒体,接近无色的细胞质。 【观察叶绿体】 1. 背景知识:叶肉细胞中的叶绿体散布于细胞质中,呈绿色、扁平的椭球形或球形。(注:水绵水绵叶绿体呈
9、叶绿体呈螺旋带状螺旋带状) 2. 原理:无需染色无需染色,随时保持有水保持有水的临时装片即可在高倍镜高倍镜下直接直接观察。 3. 选材:新鲜藓类叶、菠菜叶、黑藻叶(叶片是单层细胞,属于真核生物)等。 撕取菠菜叶中稍带些叶肉的下表皮原因撕取菠菜叶中稍带些叶肉的下表皮原因:下表皮细胞含少量叶绿体;下表皮细胞靠近海绵组织,较易撕取且不至于细胞过于密集;下表皮气孔较多,即使没撕取到叶肉细胞,气孔的保卫细胞中也含少量个大的叶绿体。 4. 观察:先低后高。 5. 此外:能通过叶绿体的流动方向判断活细胞内胞质环流胞质环流现象与方向(显微镜下和实际方向一致显微镜下和实际方向一致)。 七、植物细胞的吸水和失水
10、p62(此实验请同学们结合上课笔记进行学习) 1. 材料:成熟植物细胞。如洋葱鳞片叶外外表皮;黑藻叶片黑藻叶片 2. 能吸水和失水的原理能吸水和失水的原理:成熟植物细胞具有中央大液泡,故具有原生质层(可作为半透膜);人为控制外界溶液浓度,可与细胞液浓度之间形成浓度差。进而,构成活细胞中的渗透系统(半透膜+浓度差)。 3. 能发生质壁分离及其复原的原理能发生质壁分离及其复原的原理:活活的的成熟成熟的的植物植物细胞具中央大液泡细胞具中央大液泡,可构成渗透系统渗透系统;原生质层的伸原生质层的伸缩性比细胞壁的大缩性比细胞壁的大;细胞壁是全透性的,细胞膜是选择透过性的。 (注:蔗糖溶液能完全透过植物细胞
11、壁,透过细胞膜的速率极慢几乎可认为不能透过植物细胞膜) 4. 试剂:质量浓度 0.3g/mL 的蔗糖溶液,即 30%蔗糖溶液;低渗溶液(一般是清水)。 5. 方法:引流法、自身前后对照、显微镜观察法(观察 3 次,引流 2 次;全程低倍全程低倍) 6. 现象:关注原生质层与细胞壁之间的距离变化,中央关注原生质层与细胞壁之间的距离变化,中央大大液泡液泡的的大小变化、液泡颜色深浅变化大小变化、液泡颜色深浅变化。 7. 思考:植物细胞会过多吸水而涨破吗?(答案:不会,因为有不会,因为有植物植物细胞壁的保护细胞壁的保护) 8. 思考:选用洋葱鳞片叶内表皮内表皮+红墨水红墨水可以探究质壁分离
12、和复原现象吗?(答案:可以) 八、酶相关的实验 p79+p83(结合上课总结的内容复习) 1. (1)酶的催化作用、酶的最适温度/pH; (2)酶的特性探究(高效性、专一性)、影响酶活性的因素(T、pH)。 2. 注意复习角度注意复习角度:1. 酶的选择 2.实验步骤顺序 3.梯度及温度或 pH 设置的合理性 4.观测变量与方法的选择 3. 催化作用和高效性:过氧化氢酶、催化作用和高效性:过氧化氢酶、FeCl3、加热、加热 专一性:一种酶两种底物或一种底物两种酶专一性:一种酶两种底物或一种底物两种酶 T 对酶活性影响:不用过氧化氢酶;一般选用淀粉酶,但只能检测底物对酶活性影响:不用过氧化氢酶;
13、一般选用淀粉酶,但只能检测底物 pH 对酶活性影响:不用淀粉酶、脂肪酶和蛋白酶;一般选用过氧化氢酶,检测产物对酶活性影响:不用淀粉酶、脂肪酶和蛋白酶;一般选用过氧化氢酶,检测产物 九、探究酵母菌细胞呼吸的方式 p91 1. 实验目的:探究酵母菌只能进行无氧呼吸?有氧呼吸?还是兼性厌氧? 2. 实验设计时:运用了背景知识,即酵母菌:单细胞真菌、真核生物、有氧和无氧条件下均能生存故酵母菌:单细胞真菌、真核生物、有氧和无氧条件下均能生存故酵母酵母菌的菌的异化类型是兼性厌氧型。异化类型是兼性厌氧型。 3. 实验方法:设计对比实验,两组实验组互为条件对照条件对照(一组有氧,一组无氧) 4. 实验装置:
14、5. 检测检测 CO2:澄清石灰水(是否变浑浊及浑浊程度);溴麝香草酚蓝水溶液(由蓝变绿再变黄由蓝变绿再变黄,变黄时间) 6. 检测酒精检测酒精(学名乙醇):(浓 H2SO4酸化的)酸性重铬酸钾溶液酸性重铬酸钾溶液。颜色变化变化:橙色橙色灰绿色灰绿色。 十、探究生物细胞的呼吸作用类型(结合上课笔记和光合呼吸专题 1 复习时黑板上画的) 十一、绿叶中光合色素的提取和分离 p97 1. 提取提取原理原理:不同光合色素易溶于有机溶剂如无水乙醇。 用提取剂-无水乙醇(95%乙醇+无水碳酸钠或丙酮也可代用但较少用)。 2. 分离分离原理原理: 不同光合色素在层析液中的溶解度不同, 溶解度高的随层析液在滤
15、纸上扩散得快, 反之则慢。 用有机试剂-层析液(93 号汽油也可代用) 3. 实验器材:二氧化硅、石英砂、无水乙醇、单层尼龙布、棉塞;干燥定性滤纸、铅笔、毛细吸管;层析液等。作用: 试剂 作用 注意事项 4. 合理操作下的实验合理操作下的实验结果结果:(以下是(以下是长形滤纸条上长形滤纸条上的分离结果;请结合上课的口诀记忆)的分离结果;请结合上课的口诀记忆) 由上至下的色素:胡 黄 a b 由上至下的颜色:橙黄 黄 蓝绿 黄绿 由上至下的含量:a 多胡少(再是 b 黄) 十二、探究环境因素对光合作用强度的影响 p107(结合上课笔记复习) 提示:重点吃透叶片上浮法、液滴移动法和半叶
16、称重法 十三、探究细胞大小与物质运输的关系 p110 1. 实验目的:通过探究细胞大小(相对表面积)与物质运输效率之间的关系,探讨细胞不能无限长大的原因。 2. 实验类比: 不同大小琼脂块 细胞大小 NaOH 扩散速率=扩散深度扩散深度 物质运输速速率 体积比体积比(NaOH 扩散的体积/整个琼脂块体积) 物质运输运输效效率率 3. 实验结果: (1)扩散深度一样,物质运输速率一样。扩散深度一样,物质运输速率一样。 (2)细胞体积越大,相对表面积(细胞体积越大,相对表面积(把细胞当做球体的话,把细胞当做球体的话,S=r3)越小,体积比越小,物质运输效率越低。)越小,体积比越小,物质运输效率越低
17、。 (3)结论:所以细胞不能无限长大。结论:所以细胞不能无限长大。 4. 思考思考 1:限制细胞不能无限长大的原因? 答:细胞体积越大,相对表面积越小,物质运输效率(效率(not 速率)速率)越低(细胞表面积与体积的关系); 核核 DNA 的含量的含量是一定的,不会随细胞体积增大而增多是一定的,不会随细胞体积增大而增多(核质比)。 思考思考 2:细胞体积越小,相对表面积越大,物质运输效率越高。但细胞体积越小越好吗? 答:不是。如如细胞内每个酶促反应需要空间。 十四、观察根尖分生组织细胞的有丝分裂 p115 1. 背景知识:根的结构(上课已讲清楚) 2. 原理:(1)高等植物体内有丝分裂常见于根
18、尖、芽尖等分生区细胞分生区细胞。(2)各个细胞的分裂是独立独立进行的,故同一分生组织中可同时看到处于不同时期的细胞。(3)通过高倍镜下观察各时期细胞内染色体(或质)的存在状态存在状态(即数目、形态),可判断各细胞所处的分裂时期,进而认识整个有丝分裂过程。(4)染染CaCO3 防止研磨中防止研磨中色素色素被破坏被破坏 1.无水乙醇要分多次加入分多次加入,并且迅速迅速研磨 石英砂 (二氧化硅=SiO2) 助于研磨得充分助于研磨得充分 2.通风通风下进行层析时,避免吸入过多挥发性物质 无水乙醇(有机) 溶解并溶解并提取提取光合色素光合色素 3.划滤液细线:干燥后,重复重复两到两到三次三次;细、直、齐
19、细、直、齐 层析液(有机)+滤纸 分离光合色素分离光合色素 4.不能让滤液细线触及层析液不能让滤液细线触及层析液,否则得不到色素带 单层尼龙布单层尼龙布 过滤研磨液 毛细吸管毛细吸管 沿铅笔线画画滤液细滤液细线 色体易被碱性染料染成深色色体易被碱性染料染成深色。 3. 试剂:解离液(15%盐酸盐酸+95%酒精的酒精的混合混合液(液(1:1) 碱性染料(溶液本身 pH 是酸性的):醋酸洋红液、龙胆紫醋酸洋红液、龙胆紫或改良的苯酚品红染液改良的苯酚品红染液 4. 步骤: 培养根尖:温暖地方进行洋葱根尖培养(待根长约 5cm) 制作装片:解离-漂洗-染色-制片(这 8 字骤要背,且顺序要
20、对字骤要背,且顺序要对) 解离解离 解离液处理 3-5min 使组织细胞相互分离细胞相互分离 细胞死亡-故无动态变化 漂洗漂洗 清水处理约 10min 洗去药液,防止解离过度防止解离过度 这步处理这步处理时间最长时间最长, 解离过度会使得根尖过于酥软 染色染色 碱性染料处理 3-5min 使染色体着色,便于观察 染色体被染成深色 制片制片 取出根尖置于载玻片-滴一滴清水-盖玻片-加载玻片再按压 使细胞分散细胞分散,便于观察 否则视野中细胞会重叠 观察:先低倍找分生区低倍找分生区(分生区分生区细胞呈正方形,排列紧密细胞呈正方形,排列紧密);换高倍先找中期高倍先找中期,再找其他时期细胞,最后找间期
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