苏教版高中生物选修一精品课件:1.1 微生物的分离和培养
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1、第1课时 微生物的分离和培养,第一章 无菌操作技术实践,学习导航 1.简述高压蒸汽灭菌锅的使用方法及注意事项。 2.掌握制备细菌培养基的方法。 3.学会利用无菌操作技术接种与培养大肠杆菌。 重难点击 1.培养基的配制方法及常见种类。 2.大肠杆菌的接种与分离培养。,一、微生物分离和培养的基本理论,二、大肠杆菌的接种与分离培养,内容索引,当堂检测,一、微生物分离和培养的基本理论,基础梳理,1.无菌操作技术 实验室常利用高温处理达到灭菌效果,包括采用 或 等方法。 (1)干热灭菌方法是将拟灭菌的物品放在 内,在160170 温度下加热12 h以达到灭菌的目的。 (2)湿热灭菌方法常采用 进行,如手
2、提式高压蒸汽灭菌锅就是实验室常用的灭菌仪器之一。高压蒸汽灭菌锅的使用包括加水、装锅、 、 、出锅等步骤。,干热灭菌,湿热灭菌,干热灭菌箱,高压蒸汽灭菌锅,加热排气,保温保压,2.配制培养基 (1)培养基概念:为人工培养微生物而制备的适合微生物 、 或积累代谢产物的 。 (2)培养基类型 天然培养基:采用动植物组织或微生物细胞以及它们的提取物或粗消化物配制而成,如牛肉膏蛋白胨培养基。 优点: 、营养丰富、配制简便; 缺点: 难以控制、实验结果的重复性较差。,生长,繁殖,营养基质,取材便利,营养成分,合成培养基:由 的分析纯等级别的高纯度化学试剂加蒸馏水配制而成,如葡萄糖铵盐培养基。 优点:化学成
3、分及其含量 、实验的可重复性好; 缺点:配制繁琐、成本较高。 (3)培养基成分:一般都含有 、 (提供碳元素的物质)、 (提供氮元素的物质)和无机盐等最基本的物质。 (4)培养基的配制原则:在配制培养基时,根据 的不同需要,有时还要加入维生素等特殊的营养物质,并要调节培养基的 使之满足微生物生长的需要。,准确称量,明确,水,碳源,氮源,拟培养的微生物,pH,3.接种微生物 (1)接种的概念:在 条件下将微生物接入 的操作过程。 (2)常用的接种工具: 、 、接种环等。 (3)接种方法 用 进行穿刺接种。 用接种环进行斜面接种或在固体培养基平板上进行划线接种。 用 进行涂布平板接种等。,无菌,培
4、养基,玻璃涂布器,接种针,接种针,玻璃涂布器,问题探究,1.“无菌操作”与人们的生活休戚相关,无时无处不在。在日常生活、生产实践、自身健康防护中,有哪些“无菌操作”的例子?,答案,答案 日常生活、生产实践、自身健康防护中“无菌操作”的例子分别有:(1)被褥、鞋袜要常晒;肉制品储存时用盐腌等。 (2)家畜阉割后,要在其伤口处涂抹一些酒精或白酒;初冬杨树树干涂刷生石灰水等。 (3)打针时,注射部位要用酒精棉球擦洗,一般要在其伤口处涂抹一些碘酒。,2.实验室常利用高温处理达到灭菌效果,包括采用干热灭菌或湿热灭菌等方法。以下图高压蒸汽灭菌锅的使用为例,探究无菌技术的方法。,(1)高压蒸汽灭菌的使用原理
5、是什么? 答案 使用原理:将待灭菌物品放在盛有适量水的高压蒸汽灭菌锅内;把锅内的水加热煮沸,并把其中原有的冷空气彻底驱尽后将锅密闭;再继续加热就会使锅内的蒸汽压逐渐上升,从而温度也随之上升到100 以上。 (2)简述手提式高压蒸汽灭菌锅的使用步骤。 答案 加水、装锅、加热排气、保温保压、出锅等。,答案,(3)消毒和灭菌的原理是什么?消毒和灭菌都能杀死所有的微生物吗?是否适用于所有的生物和物品? 答案 都是使微生物的蛋白质变性,借此杀死微生物。 灭菌可杀死处理材料中的全部微生物(包括芽孢和孢子),而消毒仅能杀死物体表面或内部的部分微生物(一般不包括芽孢和孢子)。 不是,无菌技术既要考虑效果,又要
6、考虑操作对象的承受能力。例如,活体生物材料、操作者的双手等只能消毒,而不能灭菌。 (4)无菌技术除了用来防止实验室的培养物被其他外来微生物污染外,还有什么目的? 答案 还能有效避免污染环境以及操作者自身被微生物感染。,答案,3.微生物的培养离不开培养基,根据下面某微生物培养基的配方回答下列问题:,(1)该培养基的碳源、氮源分别是什么? 答案 碳源:C6H12O6;氮源:NaNO3。 (2)依据物理性质用途划分,该培养基属于什么培养基? 答案 依据物理性质划分,该培养基属于液体培养基;依据用途划分,则属于选择培养基。 根据培养基的原料,所培养微生物的同化作用的类型是异养型,培养的微生物可能是酵母
7、菌或霉菌。 (3)在固体培养基中加入的琼脂能为微生物提供营养吗?为什么? 答案 不能,微生物不能分解琼脂。 (4)普通培养基能培养病毒吗?为什么? 答案 不能,因为病毒只能进行活细胞寄生生活。,答案,(1)消毒与灭菌的区别,(2)培养基的成分及功能,拓展应用,1.高温灭菌的原理是 A.每种微生物生长的最适温度是一定的 B.微生物对于高温环境不适应 C.高温破坏了微生物细胞内的蛋白质、核酸,影响其生命活动 D.高温降低了环境中氧的浓度,解析 高温的致死作用主要是使微生物的蛋白质和核酸等重要生物大分子物质发生不可逆转的变性。,答案,解析,解析 根据培养基的物理性质,可分为液体培养基、半固体培养基和
8、固体培养基,在液体培养基中加入不同量的凝固剂如琼脂可形成半固体或固体培养基;除水以外的无机物如NH4HCO3,既可以是碳源,也可以是氮源,不仅仅提供无机盐;无机氮源有时也能提供能量,如NH3可以为硝化细菌提供能量。,2.下列关于培养基的说法正确的是 A.培养基是为微生物的生长繁殖提供营养的基质 B.培养基只有两类:液体培养基和固体培养基 C.除水以外的无机物只能提供无机盐 D.无机氮源不可能提供能量,答案,解析,培养基的种类,二、大肠杆菌的接种与分离培养,基础梳理,1.配制牛肉膏蛋白胨培养基,_,调节pH,_,灭菌,2.斜面接种和培养大肠杆菌 斜面接种大肠杆菌的主要目的有 、 和保存纯净菌种等
9、。具体操作步骤:,菌种转移,扩大培养,_,接种环灭菌,_,划线接种,_,保存菌种,3.平板划线分离和培养大肠杆菌 在实验室中,平板常常被用来 细菌等微生物。 (1)牛肉膏蛋白胨固体培养基的平板制作 配制好的培养基装瓶 倒平板操作(A.打开瓶塞B._C.倒培养基D. )。 (2)平板划线分离与培养大肠杆菌 平板划线法的含义:用带有微生物的 在平板培养基表面通过分区划线而纯化分离微生物的一种方法。 注意事项:接种和划线操作时需要在 附近进行。,培养、分离,灭菌,灼烧瓶口,灭菌,倒置平板,接种环,酒精灯火焰,问题探究,1.利用培养基培养微生物时,首先要把微生物接种到培养基上。以牛肉膏蛋白胨培养基的配
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